न्यूक्लिक एसिड निकासी वा शुद्धीकरण किट
Nucleic Acid Extraction Or शुद्धीकरण Kitवा -20 ℃ मा भण्डारण। नमूना ० ℃ कर्लिंग प्रयोग गरेर ढुवानी गरिनु पर्छ।
Introduction
न्यूक्लिक एसिड निकासी वा शुद्धीकरण किट (चुम्बकीय मोती विधि) शरीरको तरल पदार्थ (जस्तै स्वाब, प्लाज्मा, सीरम) बाट आरएनए र डीएनए को स्वचालित शुद्धिकरणको लागि स्वचालित न्यूक्लिक एसिड निकासी उपकरणहरू प्रयोग गरी डिजाइन गरिएको हो। चुम्बकीय कण टेक्नोलोजीले उच्च गुणस्तरको DNA/RNA प्रदान गर्दछ जुन डाउनस्ट्रीम अनुप्रयोगहरू जस्तै प्रवर्धन वा अन्य इन्जाइम्याटिक प्रतिक्रियाहरूमा प्रत्यक्ष प्रयोगको लागि उपयुक्त हुन्छ।
Application Range
पूरै रगत, प्लाज्मा, सीरम र अन्य तन्तुका नमूनाहरू सीधै लिस र पचाइएको थियो। जारी गरिएको न्यूक्लिक एसिडलाई सुपर प्यारामैग्नेटिक न्यानोमिटर चुम्बकीय मोतीहरूद्वारा छनोट गरिएको थियो। त्यसपछि प्रोटिन, अजैविक नुन आयनहरू र जैविक अशुद्धताहरू धुने घोलबाट हटाइयो। अन्तमा, शुद्ध न्यूक्लिक एसिड समाधान प्राप्त गर्न एल्युएन्टको साथ न्यूक्लिक एसिड एल्युट गरियो।
Kit Contents
बिरालो। छैन। | YXN-VIRAL01-32A-BR | अवयवहरू | ||
-50A | - 100A | |||
साइज | ३२ टेस | ५० परीक्षण | १०० परीक्षण | |
लाइसिस बफर | 96 well प्री-प्याक ed प्लेटहरू २ टुक्रा | 25ml | ५० एमएल | Surfactant र Tris |
धुने बफर I | ★15ml | ★30ml | उच्च नमक समाधान | |
बफर Il धुनुहोस् | ★6ml*2 | ★12ml*2 | कम नमक समाधान | |
इलुसन बफर | 10ml | 20ml | कम नमक समाधान | |
MagaBio अभिकर्मक | 1.0ml | 2.0ml | चुम्बकीय कणहरू | |
ह्यान्डबुक(=YXN-VIRAL01-32A-BR) | 1 | 1 | 1 | |
Notes:को लागीYXN-VIRAL01-32A-BR-50A,प्रयोग गर्नु अघि ★15mL धुने बफर I मा 15mL निरपेक्ष इथेनॉल थप्नुहोस्; प्रयोग गर्नु अघि ★6mL धुने बफर Il मा 24mL Absolute ethanol थप्नुहोस्। | ||||
को लागीYXN-VIRAL01-32A-BR-100A, प्रयोग गर्नु अघि ★30mL धुने बफर I मा 30mL निरपेक्ष इथेनॉल थप्नुहोस्; 48mL निरपेक्ष इथेनॉल थप्नुहोस् ★12mL बफर Il प्रयोग गर्नु अघि धुनुहोस्। |
Stसुन्तला Conditions
किटको आगमनमा, किटका अवयवहरूलाई कोठाको तापक्रम (१५ − २५ डिग्री सेल्सियस) मा भण्डारण गर्न सकिन्छ। अभिकर्मकहरू निर्माण मिति देखि एक वर्ष सम्म स्थिर छन्।
Sample Requirements
1. लागू नमूना: स्वाब्स, प्लाज्मा, सीरम र सम्पूर्ण रगत आदि।
2. नमूना भण्डारण र यातायात: नमूना तुरुन्तै परीक्षण गर्नुपर्छ
Materials र Devices Required but Not Provided
1. डिस्पोजेबल पाउडर-मुक्त पन्जा
2. बायोहाजार्ड कन्टेनर
३. पेन्सिल वा प्रति
Procedure
जैविक न्यूक्लिक एसिड निकासी उपकरणमा निकासी अभिकर्मकको सञ्चालन चरणहरू संक्षिप्त रूपमा व्याख्या गर्न उदाहरणको रूपमा निम्नले नमूना स्ट्रिप निकासी स्वाब लोशन प्रयोग गर्दछ।Bioer NPA-३२पीवाSMART 32। अन्य नमूना प्रकारहरूको लागि, कृपया प्रयोगकर्ता पुस्तिका हेर्नुहोस्। यो पनि प्रयोगात्मक अधिग्रहण अनुसार ग्राहकहरु द्वारा संचालित गर्न सकिन्छ:
1. अभिकर्मक तयारी
a को लागीYXN-VB03-32A-50A र YXN-VB03-32A-100A
2.2mL 96-deep-well प्लेटको स्तम्भ 1 र 7 मा 500uL Lysis बफर, स्तम्भ 2 र 8 मा 500uL धुने बफर I, स्तम्भ 3, 4 र 9,10 मा 500uL वास बफर II थप्नुहोस्; स्तम्भ 5 र 11 मा 70uL इल्युसन बफर, 180uL शुद्ध पानी र 20uL MagaBio अभिकर्मक स्तम्भ 6 र 12 मा (प्रयोग गर्नु अघि चुम्बकीय मोतीहरू राम्ररी मिसाउनु पर्छ),
b को लागीYXN-VB03-32A
कोठाको तापमानमा 96 राम्ररी पूर्व-प्याक अभिकर्मकहरू राख्नुहोस्। 96-राम्रो प्लेटलाई तीन पटक उल्टो हल्लाउनुहोस्, र प्लास्टिकको झोला च्यात्नुहोस्। पूर्व-प्याक गरिएको अभिकर्मकलाई केही सेकेन्डका लागि सेन्ट्रीफ्यूज गर्नुहोस् (वा हातले केही पटक घुमाउनुहोस्) अभिकर्मकले ट्युबको पर्खालमा टाँसिने छैन। 96-वेल प्लेटको एल्युमिनियम पन्नी फिलिम च्यात्नुहोस् र प्लेटको दिशा पहिचान गर्नुहोस् (स्तम्भ # 6 र # 12 मा चुम्बकीय मोती),
2.नमूना निकासी
1. 96 वेल प्लेट स्तम्भहरू #1 र #7 मा 300uL नमूना थप्नुहोस्, कृपया क्रस-प्रदूषणबाट जोगिन,
2. उपकरणमा 96 गहिरो कुवा प्लेट राख्नुहोस्, उपकरणमा 8-स्ट्रिप टिपहरू स्थापना गर्नुहोस्,
3. निम्न प्रक्रियाहरू अनुसार कार्यक्रम चलाउनुहोस्,
4. स्वचालित शुद्धीकरण समाप्त भएपछि, स्तम्भ 5 र 11 मा इल्युसन बफरलाई सफा एन्टिन्यूक्लियर 0.5 एमएल सेन्ट्रीफ्यूज ट्यूबमा स्थानान्तरण गर्नुहोस्; यदि यसलाई तुरुन्तै प्रयोग गरिएन भने, कृपया -20 डिग्री सेल्सियसमा भण्डार गर्नुहोस्।
Performance Characteristics
1. निकालिएको उत्पादन 10 IU/mL को संवेदनशीलतामा पुग्न उच्च-संवेदनशीलता HBV DNA पत्ता लगाउने अभिकर्मक द्वारा पत्ता लगाइएको छ। निकालिएको उत्पादन 50 IU/mL को संवेदनशीलतामा पुग्न उच्च-संवेदनशीलता HCV RNA पत्ता लगाउने अभिकर्मक द्वारा पत्ता लगाइएको छ।
2. 4 नमूनाहरू चयन गर्नुहोस् (सीरम/प्लाज्मा नमूना, नासोफरिन्जियल स्वाब नमूना, ग्रीवा एक्सफोलिएटेड सेल नमूना), प्रत्येक नमूना 10 पटक 3 ग्रेडियन्टहरू (4 सांद्रताको मूल नमूना सहित), आन्तरिक पत्ता लगाउन योग्य अभिकर्मकहरू र परीक्षण एजेन्टहरू प्रयोग गरेर पातलो गरिन्छ। उत्पादन निर्देशनहरू अनुसार सन्दर्भ जीन, र प्रत्येक ब्याचको Ct मान १ भन्दा कमले फरक हुन्छ।
स्टेp | राम्रो स्थान | Prओग्राम नाम | Waiting Time(min:SS) | Mixing Time(mमा:SS) | Magnet Time(min:SS) | Adsorption | Sपिड | Vओलुम tatus(μL) | Temperature |
1 | 1 | Lyबहिनी | ०:०0 | 2:०० | ०:०0 | F | 700 | 80 | |
2 | 6 | Beads | ०:०0 | ०:१५ | ०:१५ | √ | F | 200 | |
3 | 1 | Bind | ०:०0 | ३:०0 | ०:४५ | √ | F | 700 | |
4 | 2 | Wखरानी १ | ०:०0 | ०:३० | ०:३० | √ | F | 500 | |
5 | 3 | Wash2 | ०:०0 | ०:३० | ०:३० | √ | F | 500 | |
6 | 4 | Wash3 | ०:०0 | ०:३० | ०:३० | √ | F | 500 | |
7 | 5 | इलुसन | 2:०० | 2:30 | ०:३० | F | 70 | 80 | |
8 | 6 | खारेज गर्नुहोस् | ०:०0 | ०:१५ | ०:०0 | F | 200 |
Safety
1. GENERAL सुरक्षा।
प्रयोगकर्ता कागजातमा निर्दिष्ट नगरिएको तरिकामा यो उत्पादन प्रयोग गर्दा व्यक्तिगत चोट वा उपकरण वा उपकरणमा क्षति हुन सक्छ। यो उत्पादन प्रयोग गर्ने जो कोहीले प्रयोगशालाहरूको लागि सामान्य सुरक्षा अभ्यासहरू र यस कागजातमा प्रदान गरिएको सुरक्षा जानकारीमा निर्देशनहरू प्राप्त गरेको सुनिश्चित गर्नुहोस्।
१.१ उपकरण वा उपकरण प्रयोग गर्नु अघि, उपकरण वा उपकरणको निर्माताद्वारा प्रदान गरिएको प्रयोगकर्ता कागजातमा प्रदान गरिएको सुरक्षा जानकारी पढ्नुहोस् र बुझ्नुहोस्।
1.2 रसायनहरू ह्यान्डल गर्नु अघि, सबै लागू हुने सुरक्षा डेटा पानाहरू (SDSs) पढ्नुहोस् र बुझ्नुहोस् र उपयुक्त व्यक्तिगत सुरक्षा उपकरणहरू (पन्जा, गाउन, आँखा सुरक्षा, आदि) प्रयोग गर्नुहोस्। SDSs प्राप्त गर्न, यस कागजातमा "कागजात र समर्थन" खण्ड हेर्नुहोस्।
2. रासायनिक सुरक्षा
सामान्य रासायनिक ह्यान्डलिंग। खतराहरू न्यूनीकरण गर्न प्रयोगशालाका कर्मचारीहरूले तल दिइएको रासायनिक प्रयोग, भण्डारण र फोहोरका लागि सामान्य सुरक्षा दिशानिर्देशहरू पढेर अभ्यास गर्ने र विशेष सावधानी र निर्देशनहरूका लागि सम्बन्धित SDS सँग परामर्श लिने सुनिश्चित गर्नुहोस्: केमिकलद्वारा प्रदान गरिएको सेफ्टी डाटा शीटहरू (SDSs) पढ्नुहोस् र बुझ्नुहोस्। कुनै पनि रसायन वा खतरनाक सामग्रीहरू भण्डारण, ह्यान्डल वा काम गर्नु अघि निर्माता।
2.1 रसायनहरूसँग सम्पर्क कम गर्नुहोस्। रसायनहरू ह्यान्डल गर्दा उपयुक्त व्यक्तिगत सुरक्षा उपकरणहरू लगाउनुहोस् (उदाहरणका लागि, सुरक्षा चश्मा, पन्जा, वा सुरक्षात्मक कपडाहरू)।
२.२ रसायनको सास फेर्न कम गर्नुहोस्। रासायनिक कन्टेनरहरू खुला नराख्नुहोस्। पर्याप्त भेन्टिलेसनको साथ मात्र प्रयोग गर्नुहोस् (उदाहरणका लागि, फ्युम हुड)।
2.3 नियमित रूपमा रासायनिक चुहावट वा स्पिलको लागि जाँच गर्नुहोस्। यदि चुहावट वा फैलिएको छ भने, SDS मा सिफारिस गरिए अनुसार निर्माताको सफाई प्रक्रियाहरू पालना गर्नुहोस्।
2.4 फ्युम हुडमा रासायनिक फोहोरहरू ह्यान्डल गर्नुहोस्।
2.5 प्राथमिक र माध्यमिक फोहोर कन्टेनरहरूको प्रयोग सुनिश्चित गर्नुहोस्। (प्राथमिक फोहोर
कन्टेनरले तत्काल फोहोर राख्छ। माध्यमिक कन्टेनरमा प्राथमिक कन्टेनरबाट फैलिएको वा चुहावट हुन्छ। दुबै कन्टेनरहरू फोहोर सामग्रीसँग मिल्दो हुनुपर्छ र कन्टेनर भण्डारणको लागि संघीय, राज्य र स्थानीय आवश्यकताहरू पूरा गर्नुपर्दछ।)
2.6 फोहोरको कन्टेनर खाली गरेपछि, प्रदान गरिएको क्यापले यसलाई बन्द गर्नुहोस्।
2.7 तपाईंको प्रयोगशालामा प्रयोग गरिएका विशेष अनुप्रयोगहरू, अभिकर्मकहरू, र सब्सट्रेटहरूद्वारा उत्पन्न हुने फोहोरहरू (आवश्यक भएमा विश्लेषण गरेर) चित्रण गर्नुहोस्।
2.8 सबै स्थानीय, राज्य/प्रान्तीय, र/वा राष्ट्रिय नियमहरू अनुसार फोहोर भण्डारण, स्थानान्तरण, ढुवानी, र डिस्पोज गरिएको सुनिश्चित गर्नुहोस्।
2.9 रेडियोधर्मी वा जैव-खतरनाक सामग्रीहरूलाई विशेष ह्यान्डलिङ आवश्यक पर्न सक्छ, र डिस्पोजल सीमाहरू लागू हुन सक्छ।
3जैविक खतरा सुरक्षा
सम्भावित जैविक खतरा। यस उपकरणमा प्रयोग गरिएका नमूनाहरूको आधारमा, सतहलाई जैविक खतरा मानिन सक्छ। जैव खतराहरूसँग काम गर्दा उपयुक्त डिकन्टेमिनेशन विधिहरू प्रयोग गर्नुहोस्।
बायोहाजार्ड। जैविक नमूनाहरू जस्तै तन्तु, शरीरको तरल पदार्थ, संक्रामक एजेन्टहरू, र मानव र अन्य जनावरहरूको रगतमा संक्रामक रोगहरू सार्ने क्षमता हुन्छ। सबै लागू हुने स्थानीय, राज्य/प्रान्तीय, र/वा राष्ट्रिय नियमहरू पालना गर्नुहोस्। उपयुक्त सुरक्षात्मक उपकरणहरू लगाउनुहोस्, जसमा समावेश छ तर सीमित छैन: सुरक्षात्मक चश्मा, अनुहार ढाल, लुगा/ल्याब कोट, र पन्जा। सबै काम उपयुक्त सुरक्षा उपकरणहरू (उदाहरणका लागि, भौतिक नियन्त्रण उपकरणहरू) प्रयोग गरी उचित रूपमा सुसज्जित सुविधाहरूमा सञ्चालन गर्नुपर्छ। सम्भावित संक्रामक सामग्रीहरूसँग काम गर्नु अघि व्यक्तिहरूलाई लागू नियामक र कम्पनी/संस्था आवश्यकताहरू अनुसार तालिम दिनुपर्छ।
निम्नमा लागू हुने दिशानिर्देशहरू र/वा नियामक आवश्यकताहरू पढ्नुहोस् र पालना गर्नुहोस्:
संयुक्त राज्य अमेरिकामा: माइक्रोबायोलोजिकल र बायोमेडिकल प्रयोगशालाहरूमा बायोसेफ्टीमा प्रकाशित अमेरिकी स्वास्थ्य र मानव सेवा विभागको दिशानिर्देशहरू: www.cdc.gov/biosafety मा फेला पर्यो।
व्यावसायिक सुरक्षा र स्वास्थ्य मापदण्डहरू, रक्तजनित रोगजनकहरू (29 CFR§1910.1030), फेला पर्यो:
www.access.gpo.gov/nara/cfr/waisidx_01/29cfr1910a_01.html
सम्भावित संक्रामक सामग्रीहरूसँग काम गर्ने/ह्यान्डल गर्नको लागि तपाईंको कम्पनी/संस्थाको जैव सुरक्षा कार्यक्रम प्रोटोकलहरू। बायोहाजार्ड दिशानिर्देशहरूको बारेमा थप जानकारी www.cdc.gov मा उपलब्ध छ।
EU मा: जैव खतरा र जैविक सुरक्षा सावधानी सम्बन्धी स्थानीय दिशानिर्देशहरू र कानूनहरू हेर्नुहोस् र विश्व स्वास्थ्य संगठन (WHO) प्रयोगशाला बायोसेफ्टी म्यानुअल, तेस्रो संस्करणमा प्रकाशित उत्कृष्ट अभ्यासहरू हेर्नुहोस्: www.who.int/csr/resources/publications। /जैव सुरक्षा/WHO_CDS_CSR_LYO_200 4_11/en/।