नयाँ कोरोनाभाइरस (SARS-Cov-2) न्यूक्लिक एसिड पत्ता लगाउने किट
New Coronavirus(SARS-Cov-2) Nucleic Acid Detection Kit
(Fluअयस्कscent RT-PCR Probe Method) Product Manual
【Product name 】नयाँ कोरोनाभाइरस (SARS-Cov-2) न्यूक्लिक एसिड पत्ता लगाउने किट (फ्लोरोसेन्ट RT-PCR प्रोब विधि)
【Packaging specifications 】25 टेस्ट / किट
【Intended usउमेर】
यो किट कोविड १९ ले आफ्नो स्वास्थ्य हेरचाह प्रदान गर्ने शंकास्पद व्यक्तिहरूबाट नासोफरिन्जियल स्वाब, ओरोफरिन्जियल (घाँटी) स्वाब, एन्टेरियर नेसल स्वाब, मिड-टर्बिनेट स्वाब, नाक धुने र नाक एस्पिरेटहरूमा नयाँ कोरोनाभाइरसबाट न्यूक्लिक एसिडको गुणात्मक पत्ता लगाउन प्रयोग गरिन्छ। नयाँ कोरोनाभाइरसको ORF1ab र N जीनहरूको पहिचानलाई नयाँ कोरोनाभाइरस संक्रमणको सहायक निदान र महामारी विज्ञान अनुगमनको लागि प्रयोग गर्न सकिन्छ।
【Principles of the procedure 】
यो किट विशिष्ट TaqMan प्रोबहरू र उपन्यास कोरोनाभाइरस (SARS-Cov-2) ORF1ab र N जीन अनुक्रमहरूको लागि डिजाइन गरिएको विशिष्ट प्राइमरहरूको लागि डिजाइन गरिएको हो। PCR प्रतिक्रिया समाधानमा लक्ष्यहरूको विशिष्ट पत्ता लगाउनको लागि विशिष्ट प्राइमरहरू र फ्लोरोसेन्ट प्रोबहरूको 3 सेटहरू छन्, र विशिष्ट प्राइमरहरू र फ्लोरोसेन्ट प्रोबहरूको अतिरिक्त सेट अन्तर्जात हाउसकीपिङ जीनहरू पत्ता लगाउन किटको आन्तरिक मानक नियन्त्रणको रूपमा प्रयोग गरिन्छ।
परीक्षणको सिद्धान्त यो हो कि विशिष्ट फ्लोरोसेन्ट प्रोबलाई PCR प्रतिक्रियामा Taq इन्जाइमको exonuclease गतिविधिद्वारा पचाइन्छ र घटाइन्छ, जसले गर्दा रिपोर्टर फ्लोरोसेन्ट समूह र quenched फ्लोरोसेन्ट समूहलाई अलग गरिन्छ, ताकि प्रतिदीप्ति निगरानी प्रणालीले फ्लोरोसेन्ट प्राप्त गर्न सक्छ। संकेत, र त्यसपछि PCR प्रवर्द्धन को संवर्धन प्रभाव को माध्यम बाट, जांच को प्रतिदीप्ति संकेत एक सेट थ्रेसहोल्ड मान-Ct मान (साइकल थ्रेसहोल्ड) मा पुग्छ। कुनै लक्ष्य एम्प्लिकन नभएको अवस्थामा, प्रोबको रिपोर्टर समूह शमन समूहको नजिक छ। यस समयमा, फ्लोरोसेन्स अनुनाद ऊर्जा स्थानान्तरण हुन्छ, र रिपोर्टर समूहको प्रतिदीप्ति क्वेन्चिंग समूहद्वारा निभाइन्छ, ताकि फ्लोरोसेन्ट पीसीआर उपकरणले फ्लोरोसेन्ट संकेत पत्ता लगाउन सकिँदैन।
परीक्षणको क्रममा अभिकर्मकहरूको प्रयोगको अनुगमन गर्न, किट सकारात्मक र नकारात्मक नियन्त्रणहरूसँग सुसज्जित छ: सकारात्मक नियन्त्रणमा लक्षित साइट पुन: संयोजक प्लाज्मिड हुन्छ, र नकारात्मक नियन्त्रण डिस्टिल्ड वाटर हो, जुन वातावरणीय प्रदूषण निगरानी गर्न प्रयोग गरिन्छ। परीक्षण गर्दा सकारात्मक नियन्त्रण र नकारात्मक नियन्त्रण एकैसाथ सेट गर्न सिफारिस गरिन्छ।
【Main components 】
| Cat. No. | BST-SARS-25 | BST-SARS-DR-25 | कम्पोनents | |
| नामe | विनिर्देशification | क्वान्टity | क्वान्टity | |
| सकारात्मक नियन्त्रण | 180 μL/शिशी | 1 | 1 | कृत्रिम रूपमा निर्मित प्लाज्मिड, डिस्टिल्ड वाटर |
| नकारात्मक नियन्त्रण | 180 μL/शिशी | 1 | 1 | डिस्टिल्ड पानी |
| SARS-Cov-2 मिक्स | 358.5 μL/शिशी | 1 | / | विशिष्ट प्राइमर जोडीहरू, विशिष्ट पत्ता लगाउने फ्लोरोसेन्ट प्रोबहरू, dNTPs, , MgCl2, KCl, Tris-Hcl, डिस्टिल्ड वाटर, आदि |
| इन्जाइम मिक्स | 16.5 μL/शिशी | 1 | / | Taq इन्जाइमहरू, रिभर्स ट्रान्सक्रिप्टेज, UNG इन्जाइमहरू, आदि। |
| SARS-Cov-2 मिक्स (Lyophilized) | 25 परीक्षण / शीशी | / | 1 | विशिष्ट प्राइमर जोडीहरू, विशिष्ट पत्ता लगाउने फ्लोरोसेन्ट प्रोबहरू, dNTPs, Taq इन्जाइमहरू, रिभर्स ट्रान्सक्रिप्टेज, डिस्टिल्ड वाटर, आदि। |
| २x बफर | 375 μL/शिशी | / | 1 | MgCl2, KCl, Tris-Hcl, डिस्टिल्ड वाटर, आदि। |
नोट:(१) विभिन्न ब्याच किटहरूमा भएका कम्पोनेन्टहरू मिसाउन वा आदानप्रदान गर्न सकिँदैन।
(२) आफ्नै अभिकर्मक तयार गर्नुहोस्: न्यूक्लिक एसिड निकासी किट।
【Storage conditions र expiration date 】
For BST-SARS-25:लामो समयको लागि -20±5 ℃ मा ढुवानी र भण्डार गर्नुहोस्।
For BST-SARS-DR-25:कोठाको तापमानमा यातायात। लामो समयको लागि -20±5 ℃ मा भण्डार गर्नुहोस्।
दोहोर्याइएको फ्रिज-थव चक्रबाट बच्नुहोस्। वैधता अवधि अस्थायी रूपमा 12 महिनाको लागि सेट गरिएको छ।
उत्पादन र प्रयोगको मितिको लागि लेबल हेर्नुहोस्।
पहिलो खुल्ला पछि, अभिकर्मक -20 ± 5 ° C मा भण्डारण गर्न सकिन्छ 1 महिना भन्दा बढी वा अभिकर्मक अवधिको अन्त्य सम्म, जुन मिति पहिले आउँछ, दोहोर्याइएको फ्रिज-थाउ चक्रबाट बच्नको लागि, र अभिकर्मक फ्रिजको संख्या। -थाउ चक्र 6 पटक भन्दा बढी हुनु हुँदैन।
【Applicable instrument】ABI 7500, SLAN-96P, Roche-LightCycler-480।
【Sample requirements 】
1. लागू नमूना प्रकार: निकालिएको न्यूक्लिक एसिड समाधान।
2. नमूना भण्डारण र ढुवानी: 6 महिनाको लागि-20±5 ℃ मा भण्डार गर्नुहोस्। नमूनाहरू 6 पटक भन्दा बढी फ्रिज गर्नुहोस् र पगाल्नुहोस्।
【Tअनुमानing method】
1.Nucleic acid extraction
भाइरल न्यूक्लिक एसिड निकाल्नको लागि उपयुक्त न्यूक्लिक एसिड निकासी किट चयन गर्नुहोस्, र सम्बन्धित किट निर्देशनहरू पालना गर्नुहोस्। यिक्सिन बायो-टेक (गुआन्जाउ) कं, लिमिटेड द्वारा उत्पादित न्यूक्लिक एसिड निकासी र शुद्धिकरण किट वा सो बराबरको न्यूक्लिक एसिड शुद्धिकरण किट प्रयोग गर्न सिफारिस गरिन्छ।
2. Reaction reagent preparation
2.1 For BST-SARS-25:
(१) SARS-Cov-2 मिक्स र इन्जाइम मिक्स हटाउनुहोस्, कोठाको तापक्रममा भर्टेक्स यन्त्रद्वारा राम्ररी पगाल्नुहोस् र त्यसपछि छोटकरीमा सेन्ट्रीफ्युज गर्नुहोस्।
(2) 16.5uL इन्जाइम मिक्सलाई 358.5uL SARS-Cov-2 मिक्समा थपियो र मिश्रित प्रतिक्रिया समाधान प्राप्त गर्न राम्ररी मिसाइयो।
(३) सफा ०.२ एमएल पीसीआर अक्टल ट्यूब तयार गर्नुहोस् र यसलाई प्रति कुवामा माथिको 15uL मिश्रित प्रतिक्रिया समाधानको साथ चिन्ह लगाउनुहोस्।
(4) 15 μL शुद्ध न्यूक्लिक एसिड समाधान, सकारात्मक नियन्त्रण र नकारात्मक नियन्त्रण थप्नुहोस्, र अक्टल ट्यूब टोपीलाई सावधानीपूर्वक छोप्नुहोस्।
(५) उल्टो उल्टो गरेर राम्ररी मिलाउनुहोस्, र ट्यूबको फेदमा रहेको तरल पदार्थलाई केन्द्रित गर्न तुरुन्तै सेन्ट्रीफ्युज गर्नुहोस्।
1
2.2 For BST-SARS-DR-25:
(१) प्रतिक्रिया मिश्रण तयार गर्न SARS-Cov-2 Mix((Lyophilised) मा 375ul 2x बफर थप्नुहोस्। पाइपिङद्वारा राम्ररी मिलाउनुहोस् र त्यसपछि संक्षिप्त रूपमा सेन्ट्रीफ्यूज गर्नुहोस्। (एक पटक प्रतिक्रिया मिश्रण तयार भएपछि, यसलाई -20℃ मा भण्डारण गर्न सिफारिस गरिन्छ। दीर्घकालीन भण्डारण।)
(२) सफा ०.२ एमएल पीसीआर अक्टल ट्यूब तयार गर्नुहोस् र यसलाई प्रति राम्रोसँग १५μL प्रतिक्रिया मिश्रणले चिन्ह लगाउनुहोस्।
(3) 15μL शुद्ध न्यूक्लिक एसिड समाधान, सकारात्मक नियन्त्रण र नकारात्मक नियन्त्रण थप्नुहोस्, र ध्यानपूर्वक अक्टल ट्यूब टोपी छोप्नुहोस्।
(४) उल्टो उल्टो गरेर राम्ररी मिलाउनुहोस्, र ट्यूबको तल्लो भागमा तरल पदार्थ केन्द्रित गर्न द्रुत रूपमा सेन्ट्रीफ्यूज गर्नुहोस्।
3. PCR amplification (अपरेशन सेटिङहरूको लागि कृपया उपकरण म्यानुअललाई सन्दर्भ गर्नुहोस्।)
3. 1 फ्लोरोसेन्ट पीसीआर उपकरणको नमूना कक्षमा PCR 8-ट्यूब राख्नुहोस्, र लोडिङको क्रम अनुसार परीक्षणको लागि नमूना सेट गर्नुहोस्, सकारात्मक नियन्त्रण र नकारात्मक नियन्त्रण।
3.2 प्रतिदीप्ति पत्ता लगाउने च्यानल:
(1) ORF1ab जीनले FAM को पत्ता लगाउने च्यानल चयन गर्दछ (रिपोर्टर: FAM, Quencher: None)।
(२) एन जीनले VIC को पत्ता लगाउने च्यानल चयन गर्दछ (रिपोर्टर: VIC, Quencher: None)।
(३) आन्तरिक मानक जीनले CY5 को पत्ता लगाउने च्यानल चयन गर्दछ (रिपोर्टर: CY5, क्वेन्चर: कुनै पनि छैन)।
(4) निष्क्रिय सन्दर्भ ROX मा सेट गरिएको छ।
3.3 PCR कार्यक्रम प्यारामिटर सेटिङ:
| चरण | तापक्रम (℃) | समय | चक्रको संख्या | |
| 1 | उल्टो ट्रान्सक्रिप्शन प्रतिक्रिया | 50 | १५ मिनेट | 1 |
| 2 | Taq इन्जाइम सक्रियता | 95 | २.५ मिनेट | 1 |
| 3 | Taq इन्जाइम सक्रियता | 93 | १० सेकेन्ड | 43 |
| एनिलिङ विस्तार र प्रतिदीप्ति अधिग्रहण | 55 | ३० सेकेन्ड | ||
सेटिङ गरेपछि, फाइल बचत गर्नुहोस् र प्रतिक्रिया कार्यक्रम चलाउनुहोस्।
४।Results analysis
कार्यक्रम समाप्त भएपछि, परिणामहरू स्वचालित रूपमा बचत हुन्छन्, र प्रवर्धन वक्र विश्लेषण गरिन्छ। एम्प्लीफिकेशन कर्भ उपकरण पूर्वनिर्धारित थ्रेसहोल्डमा सेट गरिएको छ।
【Explanation of test results 】
1. प्रयोगको वैधता निर्धारण गर्नुहोस्: सकारात्मक नियन्त्रण FAM, VIC च्यानलमा सामान्य एम्प्लीफिकेशन वक्र हुनुपर्छ, र Ct मान सामान्यतया 34 भन्दा कम हुन्छ, तर विभिन्न उपकरणहरूको विभिन्न थ्रेसहोल्ड सेटिङहरूको कारणले उतारचढाव हुन सक्छ। नकारात्मक नियन्त्रण FAM, VIC च्यानल गैर-एम्प्लीफाइड Ct हुनुपर्छ। यो सहमति छ कि माथिका आवश्यकताहरू एकै समयमा पूरा गर्नुपर्छ, अन्यथा यो परीक्षण अमान्य छ।
2. परिणाम निर्णय
| FAM/VIC च्यानल | न्याय परिणाम |
| Ct 37 | नमूना परीक्षण सकारात्मक छ |
| 37≤Ct＜40 | एम्प्लीफिकेशन कर्भ एस आकारको छ, र संदिग्ध नमूनाहरू पुन: जाँच गर्न आवश्यक छ; यदि पुन:परीक्षाको नतिजा एकरूप छ भने, यसलाई सकारात्मक मानिन्छ, अन्यथा नकारात्मक |
| Ct≥40 वा कुनै प्रवर्धन छैन | नमूना परीक्षण नकारात्मक छ (वा किट पत्ता लगाउने तल्लो सीमा भन्दा तल) |
नोट: (१) यदि FAM च्यानल र VIC च्यानल दुबै एकै समयमा सकारात्मक छन् भने, SARS-Cov-2 सकारात्मक हुने निश्चित छ।
(२) यदि FAM च्यानल वा VIC च्यानल सकारात्मक छ र अर्को च्यानल नकारात्मक छ भने, परीक्षण दोहोर्याउनु पर्छ। यदि यो एकै समयमा सकारात्मक छ भने, यसलाई SARS-Cov-2 सकारात्मक रूपमा न्याय गरिनेछ, अन्यथा यसलाई SARS-Cov-2 नकारात्मक रूपमा न्याय गरिनेछ।
सम्बन्धित उत्पादनहरू
-
COVID-19 IgM/IgG एन्टिबडी पत्ता लगाउने किट
COVID-19 IgM/IgG एन्टिबडी पत्ता लगाउने किट 【कोलोइडल गोल्ड इम्युनोक्रोमेटोग्राफी विधि) उत्पादन म्यानुअल 【उत्पादन नाम】COVID- 19 IgM/IgG एन्टिबडी पत्ता लगाउने किट 【कोलोइडल गोल्ड इम्युनोक्रोमेटोग्राफी परीक्षण विधि) 【ECIFKITS/1SPKITS1 【 सार】 उपन्यास कोरोनाभाइरस β जीनस हो। COVID-19 एक तीव्र श्वासप्रश्वास संक्रामक रोग हो। मानिसहरू सामान्यतया संवेदनशील छन्। हाल, उपन्यास कोरोनाभाइरसबाट संक्रमित बिरामीहरू मुख्य स्रोत हुन् ...
-
न्यूक्लिक एसिड निकासी वा शुद्धीकरण किट
न्यूक्लिक एसिड निकासी वा शुद्धीकरण किट वा -20℃ मा भण्डारण। नमूना ० ℃ कर्लिंग प्रयोग गरेर ढुवानी गरिनु पर्छ। परिचय न्यूक्लिक एसिड निकासी वा शुद्धीकरण किट (चुम्बकीय मोती विधि) शरीरको तरल पदार्थ (जस्तै स्वाब, प्लाज्मा, सीरम) बाट आरएनए र डीएनए को स्वचालित शुद्धिकरणको लागि स्वचालित न्यूक्लिक एसिड निकासी उपकरणहरू प्रयोग गरी डिजाइन गरिएको हो। चुम्बकीय कण टेक्नोलोजीले उच्च गुणस्तरको DNA/RNA प्रदान गर्दछ जुन...
-
SARS-CoV-2 एन्टिजेन एसे किट (इम्युनोक्रोमेटोग्रा...
SARS-CoV-2 Antigen Assay Kit （इम्युनोक्रोमेटोग्राफी विधि) उत्पादन म्यानुअल 【PRODUCT NAME】SARS-CoV-2 Antigen Assay Kit （इम्युनोक्रोमेटोग्राफी विधि) 【प्याकेजिङ स्पेसिफिकेशन】 1 परीक्षण/Kit ACTRUS सम्बन्धित। COVID-19 एक तीव्र श्वासप्रश्वास संक्रामक रोग हो। मानिसहरू सामान्यतया संवेदनशील छन्। हाल, उपन्यास कोरोनाभाइरसबाट संक्रमित बिरामीहरू मुख्य…
-
SARS-CoV-2 एन्टिजेन एसे किट
SARS-CoV-2 Antigen Assay Kit （इम्युनोक्रोमेटोग्राफी विधि) उत्पादन म्यानुअल 【PRODUCT NAME】SARS-CoV-2 Antigen Assay Kit （इम्युनोक्रोमेटोग्राफी विधि) 【प्याकेजिङ स्पेसिफिकेशन】 1 टेस्ट/किट, 1TSTKit/2ST 】 द उपन्यास कोरोनाभाइरस β जीनस हो। COVID-19 एक तीव्र श्वासप्रश्वास संक्रामक रोग हो। मानिसहरू सामान्यतया संवेदनशील छन्। हाल, उपन्यास कोरोनाभाइरसबाट संक्रमित बिरामीहरू संक्रमणको मुख्य स्रोत हुन्; लक्षण नदेखिएका संक्रमित...